ChIP實驗
2019.08.27
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???? 染色質免疫沉淀技術(Chromatin immunoprecipitation assay, ChIP):是一種研究體內轉錄因子與基因組DNA之間互作結合的方法?;驹硎腔罴毎麪顟B下,通過多聚甲醛固定,形成蛋白-DNA復合物,運用超聲(或酶解)方法對染色體隨機剪切至一定長度范圍,通過免疫共沉淀富集結合,純化獲取轉錄因子蛋白所結合的啟動子區域片段,后續產物可用于Q-PCR檢測驗證或測序分析。

技術原理:

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技術服務流程:

1.細胞交聯固定:多聚甲醛固定活細胞(或組織)

2.核質分離:提取細胞核,獲取染色質

3.超聲破碎:超聲斷裂染色質,獲取一定范圍長度的片段

4.免疫共沉淀:獲取DNA與蛋白結合的特定復合物

5.解交聯:解除DNA與蛋白的交聯狀態,純化獲取DNA產物

6.Q-PCR檢測或建庫測序

服務優勢:

1.生物信息學方法,預測轉錄因子蛋白結合的啟動子基因,以及預測結合的特定motif,為客戶提供多選擇信息

2.直接尋找轉錄因子結合的編碼區上游靶基因,精準定位調控基因

3.設置完整組別,包括Input組,陽性組,對照組,陰性組,實驗更加嚴謹可靠

4.提供可直接用于文章的標準結果圖,以及實驗原圖結果

5.提供完善的實驗報告,更利于文章的撰寫和申請

適用研究:

1.適用于人,大鼠,小鼠等哺乳動物細胞的研究,探討與驗證體內轉錄因子蛋白調控啟動子的關系

2.適用于臨床各種組織樣品的探討研究,例:癌組織與癌旁組織,通過ChIP實驗獲取得到的樣品產物DNA,建庫測序獲取調控的啟動子基因

客戶提供:

1.IP或ChIP級抗體,抗體量>20ug

2.活細胞:1-2*10^7

3.新鮮組織:組織量>0.1-0.3g

4.驗證基因信息

輝園苑提供:

1.WB檢測抗體效價與特異性結果圖

2.染色體斷裂圖

3.完整實驗報告

4.可直接用于文章使用的處理結果圖


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