定點突變
2019.08.27
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????? 對某個已知基因序列的特定堿基進行定點改變、缺失或者插入。

? ? ? 體外定點突變技術是研究蛋白質結構和功能之間的復雜關系的有力工具,也是實驗室中改造/優化基因常用的手段。蛋白質的結構決定其功能,二者之間的關系是蛋白質組研究的重點之一。定點突變可以改變對應的氨基酸序列和蛋白質結構,對突變基因的表達產物進行研究有助于人類了解蛋白質結構和功能的關系,探討蛋白質的結構/結構域。定點突變技術的潛在應用領域很廣,比如研究蛋白質相互作用位點的結構、改造酶的不同活性或者動力學特性,改造啟動子或者DNA作用元件,提高蛋白的抗原性或者是穩定性、活性、研究蛋白的晶體結構,以及藥物研發、基因治療等等方面。


定點突變的原理

? ? ? ?定點突變是指通過聚合酶鏈式反應(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因組,也可以是質粒)中引入所需變化(通常是表征有利方向的變化),包括堿基的添加、刪除、點突變等。定點突變能迅速、高效的提高DNA所表達的目的蛋白的性狀及表征,是基因研究工作中一種非常有用的手段。

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技術路線:

1.? 引物設計。

2.? 表達載體設計。

3.? PCR點突變。

4.? DpnI酶消化。

5.? 轉化擴增載體。


客戶需提供:

1.? 靶基因/靶蛋白信息。如:已知NCBI編號,基因序列。

2.? 靶基因cDNA/DNA模板。


我們的服務:

1.? 針對性點突變引物設計及合成。

2.? 正常表達載體。

3.? 突變后表達載體。

4.? 無內毒素質粒擴增提取。

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